培养基除菌过滤装置是一种在细胞房针对粉末培养基配置成培养基后,对其进行除菌除杂质的过滤装置。由于需要再细胞房内使用,且需要放置在超净工作台或生物安全柜的台面内操作,所以操作和使用时,需要对过滤装置的主机和过滤瓶组均进行消毒灭菌,以防止过滤过程中污染滤液的问题。
一般而言,一套完整的培养基除菌过滤装置主要会包含无油抽滤泵和过滤瓶两部分,以及连接管、防倒吸阻水保护器等其他必要的附件。但是在过滤瓶组部分,一般会区分为已经灭菌的过滤瓶组和可灭菌重复使用的过滤瓶两种规格。已灭菌的过滤瓶一般是由聚苯乙烯材质制作而成,过滤膜会预先装配在过滤瓶中间。出厂前会提前采用密封包装进行预封装,并进行伽马射线辐照灭菌。此类产品的优点就是使用方便,滤膜已预装且整体都已经灭菌,只要撕开包装就能使用,非常方便。但是由于预装了滤膜,且本身材质只能耐受首次辐照灭菌,无法重复灭菌使用,所以为一次性产品,后期使用成本较高。而可灭菌重复使用的过滤瓶则采用过滤杯和滤膜基座分离设计,可以铺放滤膜,每次使用前装好滤膜一起进行高温高压灭菌,使用成本非常低,经济性更好。下面我们就以圣斯特Sciencetool的R300-500可重复使用的培养基除菌真空抽滤装置为例,来介绍如何有效消毒灭菌,避免过滤失败。
在了解具体消毒灭菌方法前,我们先来观察R300-500可重复使用的培养基除菌真空抽滤装置组成部分,不同的部分消毒灭菌的方法和要求也不尽相同。首先主机部分是一台产生负压吸力的无油真空泵。真空泵前端带有可以观察真空度和系统运行状态的真空表和可以调节吸力大小、抽滤速度的调节阀。此外前端还设有收集水汽的缓冲杯、阻挡粉尘颗粒物的PP滤芯,以及防止液体倒吸的逆止浮子可以在液体涌入缓冲杯时自动关闭抽气口,保护真空泵安全。真空泵通过一端管路连接到过滤瓶,管路中间带有防倒吸阻水保护器,可以防止滤液倒吸使真空泵进水故障。过滤瓶上部为1支500ml瓶顶式过滤器,通过GL45的螺纹和底部蓝盖试剂瓶连接,瓶顶过滤器的滤杯和滤膜基座可以分离,基座上铺放过滤膜。滤液通过滤膜后流入试剂瓶内,由于采用瓶顶式结构,过滤结束后,取下瓶顶过滤器,盖上试剂瓶盖,即可以保存滤液。过滤瓶底部被插在一个硅胶固定底座内,防止晃动或者倾倒。
综上,在消毒灭菌时,主要分为两部分,主机和管路过滤瓶。
真空抽滤泵主机一般采用酒精喷洒配合擦拭的方式来消毒除菌。这里需要注意的是,抽滤泵作为真空泵的一种,市面上许多抽滤泵产品都会在外壳上开孔,这样可以帮助设备工作时更好的会散热量。但是由于需要喷洒酒精消毒,如果酒精通过这些空洞进入设备会造成一定故障。所以在R300-500这款专门用于培养基除菌的过滤产品种,主机外控采用IP30的防护等级,表面没有任何开孔。和前代产品相比,通过改良的双侧散热风机来大幅提升设备散热性能。这样即防止了设备过热停机不工作,在喷洒酒精擦拭消毒时,又不会对设备内部产生影响。
连接管路和过滤瓶则可以直接进行121度高温高压湿热灭菌。但是需要注意的是灭菌后应当使用烘箱设置60℃以下的温度将水渍烘干。过滤瓶和管路的残留水分在收到抽滤泵吸力影响时,会被抽入真空泵内影响设备。此外,不要使用含氯的消毒液进行浸泡,会造成塑料部件的开了损坏。